【医学探索】新发现！肌原纤维性肌病患者一基因发生新的隐性致病突变……，东南大学附属中大医院神经内科主任张志珺教授、谢春明研究员、钱方媛博士，联合广东医科大学高汉超副研究员，
这项题目为《DNAJB6基因新隐性致病突变通过影响DNAJB6a的表达而导致肌原纤维性肌病》的研究成果，近日发表在神经病理领域SCI期刊《神经病理学通讯学报》上。
肌原纤维性肌病是一组病理形态特异、临床和遗传高度异质的骨骼肌疾病。该病起病年龄范围广，青少年至成年均可发病，病变主要累及四肢近端及（或）远端肌，常合并心肌病和（或）呼吸功能障碍，致残率高。约50%的肌原纤维性肌病是由编码Z线蛋白及Z线外蛋白基因突变致病，包括DES、FLNC、MYOT和DNAJB6等。
据介绍，DNAJB6基因位于第7号染色体长臂，含有10个外显子。该基因在哺乳动物中有两种选择性剪接体，分别编码两种长短不同的蛋白亚型：DNAJB6a和DNAJB6b。既往报道的DNAJB6相关肌原纤维性肌病致病突变位于该基因的第4和5号外显子，同时影响a和b两种蛋白亚型的氨基酸编码，并且患病个体在家系中的分布呈常染色体显性遗传模式。
该研究团队在一临床肌原纤维性肌病患者中发现新的DNAJB6基因隐性突变c.695_699del，位于第9号外显子的5区，该突变不影响DNAJB6b的编码，仅致DNAJB6a形成截短蛋白，临床意义不明。
为进一步阐明该突变在肌原纤维性肌病中的功能意义，研究团队分别从临床、动物和细胞层面对其进行了探索。首先，多维度的临床评估及骨骼肌组织病理学检测明确了先证者的临床和骨骼肌病理表型；详细的家系调查确定该隐性突变与肌病表型在家系中共分离；生信分析结果判定该隐性突变为肌原纤维性肌病的可能致病突变。同时，研究者利用q-PCR和WB的方法，发现总DNAJB6（野生DNAJB6a+ 突变DNAJB6a+ DNAJB6b）mRNA和蛋白表达水平均明显下降。
随后，研究者基于CRISPR/ Cas9基因编辑技术构建了与人源DNAJB6突变位点对应的敲入小鼠模型，结果证实较野生型小鼠，纯合型小鼠的DNAJB6b表达水平无明显变化，而突变后的截短DNAJB6a表达水平明显低于野生DNAJB6a。且从9月龄开始，较野生型小鼠，纯合型小鼠的运动能力显著降低；18月龄的纯合型小鼠骨骼肌病理表型与临床先证者的骨骼肌病理表型高度相似。
最后，研究者利用DNAJB6a抑制多聚谷氨酰胺聚集的HEK293T细胞模型证实，相同当量的突变型与野生型DNAJB6a对多聚谷氨酰胺蛋白的抗聚集效率是相当的，但呈量效关系。
张志珺教授表示，该研究首次在肌原纤维性肌病的患者中发现DNAJB6基因的新隐性突变DNAJB6 c.695_699del（p.Val232Gly fs*7），并在基因编辑小鼠和细胞模型中明确了该突变在MFMs中的致病性，支持DNAJB6a对维持骨骼肌结构和功能有重要的作用。
基于以上结果，研究者推测DNAJB6a表达量不足导致的功能缺失是导致肌原纤维性肌病发生的新机制。